• 特种作物名称:蛹虫草
  • 分类:菌类作物
  • 种植技术标题:蛹虫草常用菌种选育技术
  • 信息来源:食用菌,2010(3)
  • 来源单位:云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
  • 种植技术详细信息:

 

蛹虫草常用菌种选育技术

蛹虫草(Cordyceps militaris)又称北虫草,北冬虫夏草,是我国的一种兼具食用和药用价值的优质珍贵大型真菌。蛹虫草的化学成分和药理活性研究结果表明,其子座除了富含蛋白质、氨基酸、维生素及钙、锰、锌、硒等微量元素外.还含有虫草素、虫草酸、过氧化物歧化酶(SOD)等生物活性物质,具有增强动物机体免疫力、抗肿瘤、抗辐射、降血糖、降血脂、抗疲劳、延缓衰老等多种生理功效,与天然冬虫夏草有相似的医疗保健功效。蛹虫草的人工培育及其产业化研究成为国内外所共同关注的课题。日本、韩国、加拿大对蛹虫草的研究非常重视,研究不断深入;国内有关的科技人员也已为此做了大量的工作。

优良菌种是提高蛹虫草子实体生产效率和产品质量的前提条件。近年来,在蛹虫草菌种选育技术方面做了许多工作,也获得一些宝贵的经验,现介绍给大家,以供参考。

1 野生菌的驯化育种

野生蛹虫草的驯化栽培,是蛹虫草菌育种的重要内容,也是广大育种工作者主要采用的方法。2001 年开始,笔者从辽宁省庄河冰峪沟山上采集到野生蛹虫草,进行驯化育种。将采集到的野生蛹虫草孢子梗,先洗去土和杂物,用0.1%升汞或75%酒精消毒,用灭菌水冲洗后,孢子梗切取小段,接种于试管或平板固体PDA 培养基(土豆、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钠、硫酸镁)上,25℃下培养。2 d 后,在组织块上长出白色绒毛状菌丝,10 d 左右可长满。接种后,每天观察,如发现有杂菌(细菌和真菌污染)立刻挑出,此管弃掉或转接到新的斜面培养基上。为验证分离菌种是否为是所需菌种,把分离得到的菌种回接到柞蚕蛹或米饭培养基上进行出草试验,能重复原来形状的菌种留下并获得纯菌种。蛹虫草形态特征:子座单个或数个从寄主头部生长出,也有从虫体节间部长出,橙黄色,一般不分枝,高4~7 cm。头部呈棒状,长1~2 cm,粗3~5 mm,表面粗糙。子囊壳外露,近圆。

2 单孢子分离育种单孢子分离是利用蛹虫草菌的单个孢子,使其萌发成菌丝, 从而获得纯菌种。对引进十几个蛹虫草菌种进行筛选试验,具体方法:选择形态好、生长势健壮并能代表该品种性状的子实体(接近成熟),悬挂式采孢子于PDA 固体培养基上,使子囊孢子可以弹射到培养基平面上。25 ℃恒温培养3~5 d后,分别挑取子囊单孢菌落转接至PDA 斜面上,25 ℃恒温培养,待菌丝长满斜面,获得候选菌株,然后经栽培试验,筛选到优良菌。

3 组织分离育种

选无杂菌的罐头瓶中长4~6 cm 状态好的虫草子实体,不作表面消毒, 在超净工作台上用手术刀将选用的子实体切成上下两截,取上截从切开处纵向切开一个小口,沿子实体纵向撕成两块,小心用接种针在子实体上截中间或中间偏向顶端处挑取一小块子实体内部组织,接种到PDA 培养基上培养获得候选菌株,然后经栽培试验,鉴别菌种生产性能,保留优良菌株。此法特点:省去子实体表面消毒,简单易行。

4 CO60-r 射线辐射诱变育种笔者采用CO60辐射(CO60放射源为大连金洲辐照中心),γ 射线是产生于原子核的高能静电磁辐射,诱变强度大,容易产生诱变菌株。选择辐射剂量50 Gy、100 Gy、300 Gy 和500 Gy条件下分别辐射蛹虫草菌丝2 h, 分别经过栽培试验,结果显示:前三种辐射剂量可能强度不够, 菌种性能改变不大,只有后一种选育出一株蛹虫草新菌株,诱变菌株与供试菌株比较,子实体明显增粗,根数减少,但子实体重量与原来相当。

5 杂交育种

根据高新华[11]的报道,蛹虫草表现明显的二极性异宗配合习性。利用在有性过程中可能发生基因重组的子囊孢子材料,进行单核菌株交配,可以对蛹虫草菌种进行改良,以筛选到高产优质菌株或保持菌株优良性状的遗传稳定性。笔者将单孢子分离获得的不同菌种两两同时接至同一PDA 液体培养基中进行杂交,经25 ℃培养3~4 d 后,接种到米饭培养基进行栽培试验,经过筛选,得到一株生长速度快、感染力强的菌株。通过试验验证,在蛹虫草育种上,此法能够筛选出具有两个亲本优势特性的菌种,但工作量大,而且杂交几率低。车振明[12]等对蛹虫草原生质体进行了紫外诱变处理,筛选出两株诱子实体产量和虫草多糖含量都明显高于原始菌株的蛹虫草生产菌株。将来蛹虫草育种还会应用到基因工程技术,即有目的地向生产菌株中植入一至多个基因,进行改造虫草菌,以获得更优良,适合于各种需要的蛹虫草菌株。